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Estudio de la población de mastocitos en el oviducto de rata durante el ciclo estral y la preñez temprana

Study of mast cell population in the rat oviduct during estral cycle and early pregnancy

 

Director: MARIANI, María Laura Lucía

Correo electrónico: mmariani@fcm.uncu.edu.ar

 

Co-Director: PENISSI, Alicia Beatriz

 

Integrantes: PRIVITERA, Mariela; VIDAL, Jorgelina; AGUILERA, Cristina

 

Resumen Técnico: La trompa uterina u oviducto es un órgano de importancia crucial para la reproducción. En ella ocurren fenómenos como la maduración de las gametas, la fecundación y el clivaje del embrión en su tránsito hacia el útero, su lugar de implantación. Por este motivo su fisiología es altamente coordinada por distintos factores. Los mastocitos -células típicas del tejido conectivo- contribuyen con la liberación de sus mediadores -entre ellos histamina y serotonina-, tanto en su fisiología normal como patológica. Se conoce que estas células varían por influencia hormonal en los distintos momentos del ciclo estral y de la preñez, pero no se conoce bien si la histamina y serotonina que influencian el funcionamiento del oviducto, tienen su origen en los mastocitos locales, o provienen de otras fuentes. El objetivo del trabajo es estudiar la expresión morfológica y cuantificar dos mediadores (histamina y serotonina) los mastocitos en el oviducto de la rata en los distintos momentos del ciclo estral, y en diferentes días de la preñez temprana. A través del dosaje de estas monoaminas, se pretende relacionar los datos obtenidos con los morfometrícos. Para ello se obtendrán oviductos de ratas que serán procesados por medio de la técnica inmunohistoquímica utilizando anticuerpos contra histamina y serotonina. Los mastocitos que expresen estos anticuerpos se cuantificarán a través de videomicroscopía y análisis de imágenes, obteniéndose su número y el área que ocupan (morfometría). La serotonina y la histamina contenidas en los oviductos de ratas durante el ciclo estral y la preñez, se cuantificarán por HPLC con detección electroquímica. Se correlacionarán los resultados bioquímicos con los obtenidos por los análisis morfométricos para poder esclarecer el origen de dichos mediadores. Con todo, se pretende contribuir al avance del conocimiento de la mofofisiología del oviducto, aportando datos acerca de mediadores mastocitarios como la serotonina y la histamina en la biología de la reproducción.

 

Summary: The oviduct is the site of fertilization and early embryo development. The aim of this study was to investigate the morphological changes of histamine- and serotonin-containing mast cells in the oviduct of the rat during estral cycle and early pregnancy. Oviducts will obtained from Wistar rats on proestrus, estrus and diestrus, and on days 3, 4, 5, 6 and 9 of pregnancy (n3 per group). The oviductal tissues will fixed in Bouin´s fixative and processed for embedding in paraffin wax. Immunohistochemistry for histamine and serotonin was performed on serial sections, using a sensitive peroxidase-labelled streptavidin-biotin detection system. The number and area of immunostained mast cells will be measured by videomicroscopy and image analysis.  Statistical analysis: ANOVA-Scheffé´s test. Tissue serotonin and histamine levels will be measured by high performance liquid chromatography (HPLC) with electrochemical detection. Serotonin and histamine levels will be expressed per milligram wet tissue weight. Result will be presented as mean (SEM. Differences between groups will be determined using analysis of variance followed by Tuckey-Kramer multiple comparison tests. P<0,05 will be considered statistically significant. Morfological and biochemical study will be compared.