06/J230
Avances en la precisión diagnóstica de las neoplasias del cuello uterino humano mediante la proteína MN/CA9 y su coexpresión con HPV-ADN
Improved diagnosis of human cervical neoplasias using coexpression of MN/CA9 protein and HPV-DNA
Director: VARGAS ROIG, Laura María
E-mail: vargasl@lab.cricyt.edu.ar
Integrantes: LO CASTRO, Gioconda; D´ANGELO, Carmen; BRANDI, Hugo; CUELLO, Héctor Horacio; ESPUL, Carlos Alberto; RODRIGUEZ, Facundo
Resumen Técnico
El objetivo del presente proyecto es lograr reducir sustancialmente los resultados “falsos negativos” en los extendidos de Pap de células cervicales humanas. Para ello nos proponemos como objetivos específicos: 1) Correlacionar la expresión de la proteína MN/CA9 en extendidos de células cervicales con el diagnóstico efectuado con la técnica de Pap convencional y con el diagnóstico anatomopatológico en las lesiones biopsiables. 2) Correlacionar la expresión de la proteína MN/CA9 en extendidos de células cervicales con la presencia de HPV en aquellas células cuya morfología sugiera presencia de oncogenes virales. Buscamos conocer si: a) La proteína MN/CA9 es un marcador útil para identificar atipia del cuello uterino tanto en extendidos citológicos como en cortes histológicos. b) La presencia de HPV-ADN es un marcador de alta sensibilidad para detectar un factor de riesgo necesario para la iniciación de la carcinogénesis cervical. c) La complementación de Pap, MN/CA9 y HPV-ADN es un trípode importante para disminuir los resultados “falsos negativos” del extendido cervical. La metodología que se utilizará será: a) inmunocitoquímica en los extendidos de células cervicales e inmunohistoquímica en las biopsias correspondientes utilizando el anticuerpo monoclonal específico M75 (contra la proteína MN/CA9). b) PCR (reacción en cadena de la polimerasa) y RFLP (perfil largo de fragmentos de restricción) para detectar y tipificar 40 tipos de HPV que habitualmente son los que infectan al tracto anogenital. Los beneficiarios serán: a) las pacientes, que al ser diagnosticadas en los estadíos precoces de la enfermedad, podrán acceder a una terapia temprana. b) los médicos, que tendrán un recurso para mejorar el diagnóstico, evitar los falsos negativos y dirigir una terapia adecuada antes de que la patología progrese.
Summary
The goal of the project is to reduce the “false negative” results of Pap smears from human cervical cells. We propose these specific objectives: 1) To correlate MN/CA9 protein expression in cervical cells smears with the diagnosis done by conventional Pap technique and with the anatomopathologic diagnosis in the biopsies of the lesions. 2) To correlate MN/CA9 protein in cervical cells smears with HPV presence in cells with morphology that suggest presence of viral oncogenes.
We would like to know if: a) MN/CA9 protein is an useful marker to identify atipia of cervix uteri in smears and in biopsies. b) The presence of HPV-DNA is a high sensitivity marker to begin cervical carcinogenesis. c) Pap, MN/CA9 and HPV-DNA is an important tripod to decrease the “false negative” results of the cervical smears.
The methodology will be: inmunocytochemistry in cervical cells and immunohistochemistry in biopsies using the specific monoclonal antibody M75 (against MN/CA9 protein). b) PCR (polymerase chain reaction) and RFLP (restriction fragment length polimorfism) to detect and characterize 40 HPV types which usually infect anogenital tract.