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Interacción de Coxiella burnetii con la célula hospedadora: Rol del citoesqueleto en la fagocitosis y biogénesis de la vacuola parasitófora

Interaction of Coxiella burnetii with the host cell: Role of cytoskeleton in phagocytosis and parasitophorous vacuole biogenesis

 

Director: BERÓN, Walter

E-mail: wberon@fcm.uncu.edu.ar

 

Co-Director: COLOMBO, María Isabel

 

Integrantes: AGUILERA, Milto Osmar; CARMINATI, Sergio Andrés; SARTOR, Tirso

 

Resumen Técnico

Los parásitos intracelulares han diseñado diferentes estrategias para alterar los mecanismos de defensa de la célula hospedadora de tal forma de poder sobrevivir y multiplicarse en ella. Coxiella burnetii es un patógeno intracelular obligado que reside en compartimientos con característica autofagolisosomales; sin embargo quedan muchas preguntas sobre la naturaleza y la biogénesis de dicho compartimiento, como así también sobre otros eventos de su tráfico intracelular. El citoesqueleto es un elemento fundamental para la fisiología celular como por ejemplo para el proceso de fagocitosis. Nuestro objetivo es estudiar el tráfico intracelular de C. burnetii y la participación del citoesqueleto. Específicamente deseamos analizar la relación de la fagocitosis de la bacteria y la biogénesis de las vacuola parasitófora, donde reside y se multiplica dicha bacteria, con la maquinaria molecular que regula el citoesqueleto de actina de la célula hospedadora. Este estudio abarcará el uso de diversos equipos y metodologías entre ellas: microscopía de fluorescencias, confocal y electrónica, transformación de bacterias, purificación de plásmidos, transfección de células en cultivo, inmunofluorescencia indirecta, crioinmunoelectromicroscopía, ensayos de supervivencia intracelular de la bacteria. Consideramos que el desarrollo de este proyecto puede contribuir a esclarecer el mecanismo de supervivencia y multiplicación intracelular de dicho patógenos

 

Summary

The intracellular parasites have designed different strategies to alter the defense mechanisms of the host cell of such a way of being able to survive and to multiply in her. Coxiella burnetii is an intracellular obligate pathogen that resides in compartments with autophagolysosomal characteristic; nevertheless many questions stay on the nature and the biogenesis of these compartment, as this way also on other events of C. burnetii intracellular traffic .The cytoskeleton is a fundamental element for the cellular physiology as for example for the process of phagocytosis. Our goal is to study the intracellular trafficking of C. burnetii and the participation of the cytoskeleton Specifically we want to analyze the relation of the bacterium phagocytosis and the biogenesis of the parasitophorous vacuole, with the molecular machinery that regulates the actin cytoskeleton of the host cell. This study will include the use of diverse equipments and methodologies such as: fluorescence and confocal microscopy, electron microscopy, transformation of bacteria, plasmid purification, transfection of cell line, indirect immunofluorescence, cryoimmunoelectromicroscopy, intracellular bacterium survival assay. We think that the development of this project can help to clarify the mechanism of intracellular survival and multiplication of this microorganism.