06/J152

Estudio de parámetros de transformación de T.cruzi a su estado metacíclico
A study of transformation parameters of T. Cruzi to its metacyclic state


Director: BURGOS, Mario Héctor

Email: mburgos@fmed2.uncu.edu.ar

Codirector: SOSA ESCUDERO, Miguel Angel

Integrantes: SANCHEZ, Matías – GUTIERREZ, Luis

En este proyecto se utilizarán técnicas como “Western blot”, inmunofluorescencia, microscopía electrónica de transmisión para estudiar la expresión y localización de la enzima trans-sialidasa en tripanosoma  cruzi obtenidos de cultivos. Estas células serán crecidas en medio de  Diamond suplementado con suero fetal bovino. Luego de inducir la transformación metacíclica (en presencia de extracto  de intestino de vinchuca) se medirá la expresión de transialidasa mediante la técnica de “Western blot”, usando el anticuerpo específico. Por microscopía  de fluorescencia se determinará la localización de esta proteína en las células. También se hará inmunocitoquímica para microsocopía electrónica de transmisión, utilizando anticuerpos marcados con oro coloidal.

La incorporación de parásitos a macrófagos se hará sobre las células obtenidas de peritoneo de ratón o sobre una línea celular. Los macrófagos serán cultivados  en cubreobjetos y se incubarán con tripanosomas a diferentes tiempos e incubados a 37 grados en estufa con 3 % CO2. La incorporación de los parásitos a los macrófagos será observada por microscopía  óptica y con tinción con Giemsa o por microscopía de fluorescencia utilizando el anticuerpo anti transialidasa.