06/J186

Estudio de la expresión y localización de proteínas que podrían regular la secreción epididimaria
A study of the expression and localization of proteins which might regulate epididymal secretion


Director: SOSA ESCUDERO, Miguel Ángel 

Email: msosa@fmed2uncu.edu.ar

Integrantes: ROMANO, Patricia – LOPEZ, Carolina – SANCHEZ, Matías – BOSIO. María Lía – AGUADO, Andrés

En este proyecto se estudiará la expresión de los receptores a manosa-6-fosfato catión dependiente (CD-MPR) y catión independiente (CI-MPR) en células de gran actividad secretoria, como las epiteliales de epidídimo. Este estudio incluirá la cuantificación de estos receptores en células  cultivadas de epidídimo de rata por “inmunoblot”, utilizando los anticuerpos respectivos, y sus correspondientes RNAm por análisis de “northern blot” con sondas fabricadas por PCR desde sus respectivos cDNA. También queremos conocer si las células epididimarias expresan altas cantidades de proteína ARF-6 con respecto a otros tipos celulares no secretorios. Para ello cuantificaremos ARF-6 en células epididimarias  por “inmunoblot”, usando los anticuerpos específicos. Esto se justifica por el hecho de que  esta proteína está involucrada en el tránsito de macromoléculas desde endosomas hasta la membrana plasmática en oros tipos celulares. En realidad queremos conocer si los receptores a manosa –6-fosfato y las proteínas ARF-6 tienen alguna participación en la secreción y si su expresión está sometida a un control por andrógenos, dado  que el epidídimo es un órgano de gran  dependencia hormonal.  Por  ello vamos a estudiar la expresión en células cultivadas  en presencia o ausencia de testosterona. Hipotetizamos de que  CD-MPR estaría  involucrado en la secreción y que  el CI-MPR se  ocuparía del transporte  a lisosomas. También creemos que las ARF-6 deben estar altamente expresadas en células con gran actividad secretoria