06/J186
Estudio
de la expresión y localización de proteínas que
podrían regular la secreción epididimaria
A study of the expression and localization of proteins which might regulate
epididymal secretion
Director: SOSA ESCUDERO, Miguel Ángel
Email: msosa@fmed2uncu.edu.ar
Integrantes: ROMANO, Patricia – LOPEZ, Carolina – SANCHEZ, Matías – BOSIO. María Lía – AGUADO, Andrés
En este proyecto se estudiará la expresión de los receptores a manosa-6-fosfato catión dependiente (CD-MPR) y catión independiente (CI-MPR) en células de gran actividad secretoria, como las epiteliales de epidídimo. Este estudio incluirá la cuantificación de estos receptores en células cultivadas de epidídimo de rata por “inmunoblot”, utilizando los anticuerpos respectivos, y sus correspondientes RNAm por análisis de “northern blot” con sondas fabricadas por PCR desde sus respectivos cDNA. También queremos conocer si las células epididimarias expresan altas cantidades de proteína ARF-6 con respecto a otros tipos celulares no secretorios. Para ello cuantificaremos ARF-6 en células epididimarias por “inmunoblot”, usando los anticuerpos específicos. Esto se justifica por el hecho de que esta proteína está involucrada en el tránsito de macromoléculas desde endosomas hasta la membrana plasmática en oros tipos celulares. En realidad queremos conocer si los receptores a manosa –6-fosfato y las proteínas ARF-6 tienen alguna participación en la secreción y si su expresión está sometida a un control por andrógenos, dado que el epidídimo es un órgano de gran dependencia hormonal. Por ello vamos a estudiar la expresión en células cultivadas en presencia o ausencia de testosterona. Hipotetizamos de que CD-MPR estaría involucrado en la secreción y que el CI-MPR se ocuparía del transporte a lisosomas. También creemos que las ARF-6 deben estar altamente expresadas en células con gran actividad secretoria