06/J165
Maduración y capacitación
de la gameta masculina.
Mecanismos de transducción de señales involucrados en la maduración y capacitación
del espermatozoide
Maturity and enabling of the masculine gamete. Transduction mechanisms of signals
involved in maturity and enabling of the spermatozoid
Director: FORNÉS Miguel Walter
Email: mfornes@fmed2.uncu.edu.ar
Integrante: MONCLUS, María de los Ángeles
Los dominios de membrana son sectores de la membrana plasmática (mp) que tienen funciones específicas. Algunos funcionan como sitios de Transducción de Señales. En este sector se inician cascadas de eventos que llevan a cambios celulares como duplicación, secreción, rearmado del citoesqueleto, etc. Estos dominios cumplen funciones en Linfocitos tipo T, en el reconocimiento con otros linfocitos, en zonas de formación de caveolas en Fibroblastos y células endoteliales y diferentes funciones en otros tipos celulares. Estos dominios compuestos por colesterol, esfingolípidos y proteínas asociadas como caveolina, apinina, etc. se los conoce con el nombre genérico de raft. En los espermatozoides (esperm) estos dominios se han empezado a caracterizar y relacionar con funciones específicas. Algunos datos previos, como la pérdida de colesterol de la mp del esperm permite la capacitación del mismo y lo habilita para fertilizar al ovocito, lleva a postular que estos dominios de membrana – raft – podrían estar presentes y cumplir con funciones del esperm en los que la mp -a través de sus dominios- juega algún rol. Utilizando marcadores fluorescentes específicos para cada componente del raft determinaremos su presencia y colocalización – simultánea – en sperm de ratón. En una segunda etapa, localizaremos estos componentes a nivel ultraestructural con microscopía electrónica. Definida su presencia y localización analizaremos los cambios durante la maduración y capacitación, eventos críticos en la vida del esrpm. Mediante ensayos de inhibición/competencia - durante fertilización in vitro homóloga, estudiaremos la función de los raft durante la fertilización. El interés por estos aspectos es que los raft pueden ser modificados externamente sin destrucción celular. Compuestos como filipina (antibiótico con afinidad por colesterol) o azúcares complejos como metil- b -ciclo dextrina (aceptor de colesterol) han demostrado tener efecto en la Capacitación espermática sin alterar la vitalidad. Estudiaremos los raft –presencia localización y función- en esperm de ratón durante eventos críticos como la Maduración y Capacitación espermática que pueden abrir las puertas en aplicaciones tendientes a tratamientos de infertilidad masculina o en animales, de interés económico o en vías de extinción, y viceversa en tratamientos anticoncepcionales masculinos.