06/J182

Caracterización genética, bioquímica y antibiotipo de cepas de Clostridium botulinum provenientes de casos de Botulismo del Lactante
Genetic, biochemical, and anti-biotype characterization of Clostridium botulinum strains resulting from cases of Milkfed-baby Botulism


Director: SAGUA , María Delia

Email: mdsagua@yahoo.com

Codirector: FERNANDEZ , Rafael Alfredo

Integrantes: CICCARELLI, Alberto - DE JONG, Laura Inés - CABALLERO, Patricia -DEGARBO, Stella Maris - TELECHEA, Adriana - Ramos, Gloria - LÚQUEZ, Carolina - BIANCO, María Isabel - BOGNI, Cristina

El presente trabajo consistirá en: tipificar bioquímicamente las cepas aisladas de casos de BL, cepas tipo y provenientes de otros orígenes, realizar cromatografía de campos pulsados y/o amplificación al azar de DNA polimórfico, tendientes a establecer caracteres genéticos particulares, clasificar cepas mediante tipificación de toxinas, determinar la sensibilidad a los antibióticos y producción de hemoaglutininas, producir toxina bajo diferentes condiciones y establecer diferencias bioquímicas, genéticas, metabólicas entre las cepas de BL y las provenientes de otros materiales estudiados. El presente proyecto contribuirá al conocimiento epidemiológico e infectológico de la respuesta de las cepas de BL ante los antibióticos antianaeróbicos de uso en clínica humana y animal.

Se utilizará la siguiente metodología: pruebas bioquímicas convencionales para anaerobios y clostridios, previa purificación de cepas en medios sólidos incubados en atmósfera aeróbica y anaeróbica  La tipificación serológica cuantitativa de toxinas  para clasificación de cepas mediante pruebas cuantitativas de neutralización con antitoxinas botulínicas polivalentes y tipo específicas. Cromatografía gaseosa para identificación de ácidos grasos volátiles (acético, propiónico, isobutírico, butírico, isovalérico, valérico, isocaproico y caproico). Amplificación al azar del DNA polimórfico (RAPD) con equipo comercial y/o electroforesis en campos pulsados (PFGE) con endonuclesa de restricción Sma I, se usarán para caracterización genética de las cepas. La sensibilidad a los antibióticos se efectuará por concentración inhibitoria mínima por elución de discos.

El presente trabajo permitirá contribuir con el conocimiento genético, bioquímico y de susceptibilidad a antimicrobianos de cepas de BL y provenientes de otros materiales estudiados y la formación de recursos humanos en la adquisición de destrezas y habilidades en el estudio de bacterias anaeróbicas.