06/J311

Rol citoprotector de la proteína de golpe de calor Hsp70 y del factor de transcripción Nrf2 en nefropatía obstructiva neonatal.
Cytoprotective role of heat shock protein Hsp70 and of the transcription factor Nrf2 in neonatal obstructive nephropathy.

Director: GARRAMUÑO, Patricia Paula
Correo Electrónico: pvalles@fcm.uncu.edu.ar

Co-Director: MANUCHA, Walter Ariel

Integrantes: BOCANEGRA, Victoria; RINALDI TOSI, Martín; CACCIAMANI, Valeria Edith; BENARDON, María Eugenia.

Resumen Técnico: El riñón obstruido neonatal es particularmente susceptible a la generación de especies reactivas de oxígeno. En adición a la liberación de ROS por macrófagos, la deprivación de oxígeno durante la Isquemia producida por obstrucción contribuye a la generación de ROS y al subsecuente daño celular. ROS interacciona con un número de target moleculares específicos que incluyen kinasas reguladas por signos extracelulares (ERK) y MAPK; asimismo interacciona con NFkB y numerosas caspasas. Asimismo ROS interviene en el clivaje de PARP y conduce a la apoptosis. Para contrarrestar los efectos deletéreos del estrés oxidativo los organismos vivos han desarrollado numerosas estrategias de defensa. Existen evidencias de que algunas proteínas de golpe de calor (Hsps) confieren resistencia contra el stress oxidativo. Las proteínas de golpe de calor son chaperonas moleculares que participan en el adecuado plegamiento, ensamblaje y translocación de las nuevas proteínas sintetizadas. Ciertas HSP, incluyendo Hsp70 confieren protección celular mediante la modulación e inhibición del proceso de inducción a apoptosis. En adición a Hsps, ROS tambien activa la respuesta antioxidante, un mecanismo adaptativo de defensa contra  el stress oxidativo el cual es regulado por el factor de transcripción Nrf2. En este importante mecanismo las células se adaptan al stress oxidativo mediante la regulación positiva a nivel transcripcional  de genes citoprotectores que actúan para mantener el contenido de glutatión, siendo también responsables de la detoxificación  de productos derivados del stress oxidativo e incluyen S-trans-ferasas,aldehído-deshi-drogenasas y oxidoreductasas. El regulador principal es el factor de transcripción Nrf2. El objetivo del presente proyecto es establecer la participación de la proteína de golpe de calor Hsp70 y del antioxidante Nrf2 en la inducción de apoptosis por  estrés oxidativo presente en la nefropatia obstructiva neonatal. En la primera parte de este proyecto se evaluará en un modelo experimental de obstrucción  unilateral renal neonatal en rata, la participación de la Hsp y la contribución del factor de transcripción antioxidante Nrf2 a la modulación del estrés oxidativo y consecuente inhibición del proceso apoptótico en intervalos valor crecientes de tiempo post obstrucción  (2, 5 ,7 y 14 días). En la segunda parte se evaluará en células epiteliales humanas de túbulos proximales (HK2) si Hs70  y el  y el factor de transcripción Nrf2 antioxidante, mediante la  modulación de estrés oxidativo, están involucrados en la inhibición de la apoptosis en obstrucción renal.

Summary: Congenital obstructive nephropathy is one of the primary causes of renal failure in infants and children. The developing kidney is far more susceptible to injury resulting from chronic urinary obstruction in relation to adult kidneys. Whereas obstructive nephropathy in the adult is characterized by progressive interstitial infiltration by mononuclear cells, in the maturing kidney impaired renal growth and development that results both from reduced cellular proliferation and increased apoptosis are also included. Molecular events that lead to apoptosis in obstruction has not been totally clarified until now. Apoptosis appears to play a role in the genesis of tubular atrophy, although the initial stimulus for apoptosis has not been defined. Several stimuli have been involved in the apoptosis process in obstruction. Mechanical injury in obstruction includes increased oxidative stress. This project will be performed to evaluate whether the induction of Hsp70 is a cytoprotective mechanism that enhances epithelial cell survival through the oxidative stress modulation in obstructive nephropathy. In addition we will study if the antioxidant response, an adaptive mechanism to defend against oxidative stress regulated by the transcription factor, Nrf2 is involved in the apoptosis process inhibition in renal obstruction.