06/J326

Reducción de las arritmias de reperfusión mediante poscondicionamiento.
Reduction of reperfusion arrhythmias by postconditioning.

Director: PONCE, Amira Zulma
Correo Electrónico: aponce@fcm.uncu.edu.ar

Co-Director: DIEZ, Emiliano Raúl

Integrantes: LUCERO, Guillermo Andrés; CARRION, Adriana Miriam; PRADO, Natalia Jorgelina.

Resumen Técnico: Las taquiarritmias ventriculares se encuentran asociadas al fenómeno de isquemia-reperfusión miocárdica y serían la principal causa de muerte en el nuestro país. Se considera que al restituirse el flujo luego de un periodo de isquemia se produce un disbalance en la homeostasis del calcio, el metabolismo y a trastornos de comunicación intercelular relacionados con el estrés oxidativo que desencadenaría letales arritmias ventriculares del tipo de la taquicardia y la fibrilación ventricular. Se llama poscondicionamiento a la intervención farmacológica o periodos de interrupciones intermitentes del flujo, que otorgue protección miocárdica al ser aplicados luego de un periodo de isquemia. El poscondicionamiento isquémico (PCI) y el poscondicionamiento farmacológico (PCF) reducen el tamaño del infarto, pero no está claro su rol frente a las arritmias ventriculares de reperfusión (AVR). La hipótesis postula que ambos tipos de poscondicionamiento reducirían la incidencia de las AVR modificando variables electrofisiológicas, y reduciendo el daño por estrés oxidativo. El objetivo general es determinar si por acción del PCI y del PCF existe cardioprotección del daño por isquemia-reperfusión. Como objetivos específicos se plantean: evaluar la reducción de las AVR mediante el PCI y/o PCF utilizando adenosina y morfina; investigar farmacológicamente si los receptores de adenosina y/o opioides participan en el mecanismo de protección; evaluar el estado funcional de la conexina 43 (CNX43) y su rol en los mecanismos de poscondicionamiento; determinar si los canales de potasio regulados por ATP tienen participación; evaluar el efecto de las diferentes vías sobre la generación de especies reactivas del oxígeno (ROS). Se perfundirán corazones aislados de rata según la técnica de Langendorff y serán sometidos a 10 min de isquemia regional y 15 min de reperfusión. Al restituirse el flujo se realizará PCI mediante 3 episodios de reperfusión/isquemia de 30 seg cada uno o PCF con los fármacos antes mencionados. Se registrarán caudal coronario y los parámetros electrofisiológicos en potenciales transmembrana y electrograma de superficie. Los mecanismos postulados se examinarán utilizando los bloqueantes y/o agonistas adecuados. Mediante westernblot se determinará la magnitud de fosforilación de la CNX43 en el tejido. Se relacionará lo antes expuesto con la generación de ROS. Los resultados que se obtengan colaborarán en la comprensión de los mecanismos de generación de estos trastornos eléctricos y podrán servir de base para el diseño de futuras estrategias terapéuticas.

Summary: The ventricular tachyarrhythmias are associated with the phenomenon of myocardial ischemia-reperfusion and are the leading cause of death in our country. It is believed that the flow restored after a period of ischemia cause an imbalance in calcium homeostasis, metabolism and intercellular communication disorders associated with oxidative stress that trigger lethal ventricular arrhythmias of the type of tachycardia and ventricular fibrillation. Postconditioning is called to the drug or periods of intermittent interruptions of flow, which provides myocardial protection when applied after a period of ischemia. The ischemic postconditioning (IPC) and pharmacologic postconditioning (PPC) reduce infarct size, but its role is not clear against reperfusion ventricular arrhythmias (RVA). Our hypothesis is that both types of postconditioning reduce the incidence of RVAdue to changes electrophysiological variables, and reducing the damage from oxidative stress. The general objective is to determine if the IPC and the PPC confer cardioprotection against ischemia-reperfusion injury. Specific objectives are: to evaluate the reduction of the RVA through the IPC and / or PPC using adenosine and morphine; pharmacologically investigate whether adenosine receptor and / or opioids are involved in the protection mechanism, to evaluate the functional status of the connexins 43 (CNX43) and its role in the mechanisms of postconditioning; determine whether potassium channels regulated by ATP participate and to assess the effect of the different strategies on the generation of reactive oxygen species (ROS). Isolated rat hearts perfused according to Langendorff technique will be subjected to 10 min regional ischemia and 15 min of reperfusion. The flow is returned to perform IPC through 3 episodes of reperfusion / ischemia, 30 sec each or PPC with drugs mentioned above. Coronary flow will be recorded and electrophysiological parameters in transmembrane potential and electrograma surface. The postulated mechanisms are examined using blocking and/or appropriate agonists. Westernblot will be assessed the extent of phosphorylation of CNX43 in tissue. All the results will be related to the generation of ROS. The results will contribute to understand the mechanisms of generating these electrical disorders and may serve as a basis for designing future therapeutic strategies.