06/K054

Barreras epiteliales. Citoesqueleto y uniones intercelulares en células del epitelio seminífero y mioides peritubulares en el testículo.
Epithelial barriers, cytoskeleton and intercellular junctions in cells of the seminiferous epithelium and in peritubular myoid cells.

Director: CAVICCHIA, Juan Carlos
Correo Electrónico: jccavic@fcm.uncu.edu.ar

Co-Director: ZAVALA, Walter

Integrantes: LOPEZ, Luis Alerto; PALMADA, Miguel Nelson; GARAS, Silvina; STOHER, Rodrigo; FOSCOLO, Mabel; MORALES, Alfonsina; DAVILA, Juana; BERTOLDI, María Victoria.

Resumen Técnico: Se estudiarán dos barreras epiteliales de permeabilidad en el túbulo seminífero, la barrera hemato-testicular (BHT) y la formada por las células mioides peritubulares (MP). En ambas, las uniones intercelulares y el citoesqueleto asociado, filamentos de actina y de miosina, son componentes cuya modulación es aún poco conocida, aunque fueron tema de recientes tesis doctorales y publicaciones internacionales de nuestros grupos de trabajo. La unión estrecha (tight junction) y la unión intermedia (adherent junction) son las uniones fundamentales implicadas. La unión estrecha, ubicada entre las células sustentaculares de Sertoli delimita compartimientos químicos y gradientes metabólicos implicados en la barrera de permeabilidad hemato-testicular. La adherent junction se encuentra prioritariamente entre las células mioides peritubulares y fijan al citoesqueleto (en especial actina) a la membrana celular de estas células fundamental para su coordinación muscular. La célula germinal y el citoesqueleto asociado parecen cumplir un papel determinante en la organización y ensamble de la BHT, como lo sustentan nuestros trabajos previos explorando diversas especies animales o situaciones experimentales. El citoesqueleto será explorado por métodos funcionales y bajo cambios hormonales y farmacológicos puestos a punto en nuestros laboratorios. El estudio se completará con microscopía electrónica de transmisión, barrido, confocal con aparatos de última generación, por métodos inmunocitoquímicos con anticuerpos monoclonales y por técnicas de criofractura para evaluar el grado de competencia de las uniones involucradas. Esperamos encontrar mecanismos moleculares comunes o diferenciales entre ambos componentes, previendo un significativo impacto en el campo de Biología Celular y en Biología de la Reproducción.

Summary: Two epithelial permeability barriers wiIl be studied in the seminiferous tubule, the blood-testis barrier (BTB) and the one formed by the peritubular myoid cells (MP). In both, the intercellular junctions and the associated cytoskeleton, actin and myosin filaments, are components, whose modulation is still poorly known, although they were theme for resent doctoral thesis and international publications from our research group. Tight and adherent junctions are the main involved junctions. The first one, located between the sustentacular Sertoli cells, determine biochemical compartments and metabolic gradients implicated in BTH functions. Adherent junctions are mainly located among myoid cells and attach the cytoskeleton, in special actin filaments to the myoid cell membrane. This is fundamental for their muscular coordination. Germ cells and their associated cytoskeleton appear to play a mail role in the assembling and organization of the BHT. This is supported by our previous papers where diverse animal species and experimental situations are explored. The cytoskeleton will be explored with functional methods and under hormonal and pharmacological changes already proved in our laboratory. These studies wiIl be completed by transmission electron microscopy, scanning, modern confocal microscopy, immunocytochemical methods using monoclonal antibodies and by freeze-fracture techniques to evaluate de degree of competence of the involved junctional devices. We expect to found common or differential molecular mechanisms between both barriers foreseeing a significant impact in Cell Biology and in Biology of Reproduction fields.