06/J291

Participación de GTPasas Rab en el transporte intracelular de Brucella abortus.
Participation of GTPasa- Rab in the intracellular traffic of Brucella abortus.

Director: ARENAS, Graciela Nora
Correo Electrónico: gnarenas@fcm.uncu.edu.ar

Co-Director: MAYORGA, Luis Segundo

Integrantes: SALOMON, María Cristina; DAMIANI, María Elena Teresa; DEGARBO, Stella Maris; TELECHEA, Adriana del Valle; SAMARTINO, Luis; GRILLI, Diego Javier; PAEZ, Sebastián.

Resumen Técnico: Las estrategias implementadas por los parásitos intracelulares facultativos que les permiten evadir las defensas del hospedador, son en estos momentos el pilar para la erradicación de ciertas enfermedades infecciosas. La fagocitosis, el principal mecanismo de defensa inespecífico celular, es utilizado por algunos microorganismos para protegerse de los efectos microbicidas de los demás componentes de la Respuesta Inmune inespecífica y/o específica. En estudios previos hemos demostrado que Brucella es capaz de ingresar en macrófagos, manteniéndose en compartimentos de la vía endocítica: demora la fusión con endosomas tardíos, si llega a ellos es capaz de resistir el efecto de las enzimas lisosomales y no sólo afecta el compartimento que ocupa sino la vía endocítica de la célula infectada. El objetivo de nuestro proyecto es avanzar en el estudio de los mecanismos moleculares que llevan a la supervivencia de Brucella abortus dentro de fagocitos profesionales y no profesionales. Nos proponemos en estos dos años determinar los mecanismos que permiten a Brucella invadir y colonizar macrófagos. Los modelos experimentales serán utilizados para estudiar el efecto sobre ciertas proteínas de la Superfamilia GTPasa y de esta manera el papel de las mismas en la maduración de fagosomas normales y de fagosomas conteniendo estas bacterias. Esperamos además obtener modelos para caracterizar la maquinaria involucrada en la formación de fagosomas y el modo en que estos parásitos logran bloquear el proceso llegando a elaborar los fármacos para combatirlos.

Summary: The strategies implemented by the facultative intracellular parasites that allow them to evade the defenses of the host, are in these moments the prop for the eradication of certain infectious diseases. The phagocytosis, the principal unspecific cellular mechanism of defense, is used by some microorganisms to be protected from the letal effects from other components of immune response. In previous studies we have demonstrated that Brucella is capable of entering in macrophages, being kept in compartments of the endocityc pthway: it delays the merger with late endosomes, if it comes to them is capable of resisting the effect of the lysosomes enzimes and we only are affected by the compartment that occupies but the endocityc pathway of the infected cell. The aim of our project is to advance in the study of the molecular mechanisms that professionals and not professionals phagocytes take to the survival of Brucella abortus inside them. We propose in these two years to determine the mechanisms that they allow to Brucella to invade cells. The experimental models will be used to study the effect on certain proteins of the GTPasa Superfamily and hereby the role of the same ones in the ripeness of normal phagosomes and of phagosomes containing these bacteria. We wait besides to obtain models for characterize the machinery involved in the phagosomes formation and the way in which these parasites manage to block the process to elaborate the medicaments to attack them. In our laboratory we have elaborated protocols that allow us to follow the brucelas in the different steps of the digestion, determining that its destruction when it is incorporated as virulent alive strain, it is inhibits in early stadios. They fuse less with lysosomes, and still in the cases that this happen it, resists the digestion.The Rab proteins constitute a numerous subfamily belonging to the superfamily GTPasa of low molecular weight. These proteins play important roles in the regulation of the intracellular transport of membranes, across mechanisms of fusion - fission.